对DNA分子做酶切时的注意事项
对DNA分子做酶切时的注意事项 | 时间: May-21 15:27:26 | 分类:技术栏目
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双酶切制备克隆插入片段的载体，较好选择带有外源片段的质粒，是否酶切完全，从电泳条带的分子量上可以比较明确地判断。空质粒单切完全和双切完全在分子量上差异不大。
在做酶切时，也可以象PCR一样配置主反应液，每次反应前先列好反应的体系，算好需要的反应数，然后按所需反应的体系按所需反应数放大，加入buffer、酶、水，质粒栏空缺，然后混合后按除质粒DNA的体积分装，然后再在每管中加入相应体积的质粒DNA酶切，这样做的好处如下，特别是当同时有10几个阳性克隆需要鉴定时尤为明显：
（1）各反应成分均一；
（2）可大大减少限制型内切酶的使用；
（3）节省时间。
