PCR扩增产物克隆的实验要点
PCR扩增产物克隆的实验要点 | 时间: June-2 14:46:48 | 分类:技术栏目
凌仪生物提供高速离心机,美国Bio-rad伯乐电泳,德国eppendorf艾本德移液器,美国ABI基因扩增仪PCR,雅培原位杂交仪,Thermo热电离心机等实验室仪器设备,以及Corning康宁,Axygen爱思进,Greiner格瑞拉等耗材要省钱,别错过哦。引物设计主要是要注意以下几个事项:
(1)发夹结构;
(2)反向配对;
(3)GC含量(40-60%);
(4)退火温度(45-65度);
(5)引物长度(18-27bp);
(6)3' 端较好是C、G(提高结合度);
(7)引物在序列中的错配位点。
大致就这几个方面,重要性依次降低,由其是3' 端绝对不能形成发夹结构。那么你说你这段能不能设计引物呢?其实设计引物都只是好中选优的问题。